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高效液相色谱-氢化物发生-原子荧光光谱法测定富硒食品中5种形态硒的含量
作者: 秦玉燕 时鹏涛 王运儒 甘志勇 李鸿 蒋越华 赵媛 吴凤
关键词: 高效液相色谱-氢化物发生-原子荧光光谱法 木瓜蛋白酶提取 富硒食品 硒形态
摘要：提出了将高效液相色谱-氢化物发生-原子荧光光谱法应用于富硒食品中硒的形态分析.选择木瓜蛋白酶(PP)作为提取剂,在如下优化条件下对样品中5种形态硒进行提取:① 料液比1 g/40 mL;②50.0 g·L-1PP溶液加入量20 mL;③ 于60 ℃水浴中振荡提取8 h.提取液冷却并离心后取其上清液,用Hamilton PRP-X100离子交换色谱柱作为固定相,35 mmol·L-1磷酸氢二铵溶液(pH 6.0)作为流动相进行高效液相色谱的分离,5种形态硒[Se(Ⅵ)、Se(Ⅳ)、硒代胱氨酸(SeCys2)、甲基-硒代半胱氨酸(MeSeCys)和硒代蛋氨酸(SeMet)]在16 min内完全分离.将分离所得分别含有5种形态硒的溶液先后引入仪器进行氢化物发生-原子荧光光谱法测定.结果表明:5种形态硒的质量浓度均在5~100 μg·L-1内与其对应的峰面积呈线性关系,5种形态硒的检出限(3S/N)为0.39~1.18 μg·L-1.按所提出方法对富硒大米样品进行加标回收和精密度试验,测得回收率为80.2%~118%,测定值的相对标准偏差(n= 6)为2.1%~8.2%.