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高效液相色谱法测定人血浆中的维生素D3及25-OH-D3
作者: 张洁 张欣烨 马青青 张利锋 张伟 河南省疾病预防控制中心 郑州450016
关键词: 高效液相色谱法 维生素D3 25-OH—D3 人血浆
摘要:采用高效液相色谱法测定血浆中维生素I)3和25-OH~D3的含量。样品经乙醇-乙腈(60+40)混合溶液提取后,提取液用氮气吹干,残渣用正己烷溶解后,过Waterssilica固相萃取拄净化,净化液用氮气吹干后,将残余物溶于pH6.5的5mm01.L叫磷酸盐溶液-乙腈-甲醇(30+15+55)缓冲溶液中。待测物在SymmetryC18色谱柱上分离,以pH6.5的乙腈-5mm01·L-1磷酸盐(20+80)混合液为流动相A,以甲醇-乙腈-四氢呋喃(65+20+15)混合液为流动相B,进行梯度洗脱;采用光电二极管阵列检测器,检测波长为265nm。维生素Dn和25-OH—D3的线性范围均为3.0~72μg·L-1,检出限均为2.0μg·L-1加标回收率在88.5%~94.1%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)小于4%。